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紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定

更新時間:2017-12-20點(diǎn)擊次數(shù):1426

[目的要求]1、學(xué)習(xí)和掌握用紫外分光光度法定性的原理和方法2、學(xué)習(xí)紫外分光光度計的使用方法了解基本結(jié)構(gòu),掌握紫外分光光度法定量的原理和方法。

[基本原理]

紫外分光光度法其比較重要的用途是用于有機(jī)化合物的定性和定量分析方面。因?yàn)楹芏嘤袡C(jī)化合物及其衍生物在紫外波段有強(qiáng)的吸收光譜,可以把未知試樣的紫外吸收光譜圖和標(biāo)準(zhǔn)試樣(或與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)圖譜)比較,當(dāng)濃度和溶劑相同時,若兩者的譜圖相同峰、極小值和拐點(diǎn)的λ相同),而且未知樣品大體已知時,可以說明它們是同一個化合物。但是在紫和可見光區(qū)域,這些特征的峰、極小值和拐點(diǎn)的數(shù)目往往是有限的,且紫外吸收光譜的吸收峰還較寬,兩種不同的化合物可能有相同的紫外吸收光譜,對于*未知的有機(jī)化合物,有時可以通過改換溶劑和適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)處理之后所得的未知標(biāo)準(zhǔn)光譜對照不僅比較λ,還要比較它們的λmax和A,來進(jìn)一步確證,甚還要進(jìn)一步借助紅外、核磁和質(zhì)譜等手段才能后得出結(jié)論。    紫外分光光度法進(jìn)行定量分析是有快速,靈敏度高及分析混合物中各組份有時不需要事前分離,不需要顯色劑,因而不受顯色劑溫度及顯色時間等因素的影響,操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。目前廣泛用于微量或痕量分析中。但有一個局限性,就是待測試樣必須在紫外區(qū)有吸收并且在測試濃度范圍服從比耳定律才行。    利用紫外光度法測定試樣中單組份含量時,通常先測定物質(zhì)的吸收光譜,然后選擇大吸收峰的波長進(jìn)行測定。其原理與一般比色分析相同??捎脴?biāo)準(zhǔn)工作曲線法。如果通過實(shí)驗(yàn)證明,在測定條件下符合比耳定律,也可以不用標(biāo)準(zhǔn)曲線而與標(biāo)準(zhǔn)品的已知濃度溶液比較求出未知樣品濃度。[儀器試劑]

751G型,752型及53WB型紫外可見分光光度計;1 cm石英比色皿未知物1—環(huán)己烷溶液;未知物2—環(huán)己烷溶液;未知物3—乙醇溶液未知物4—乙醇溶液;萘的標(biāo)準(zhǔn)溶液:(1)1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)萘溶液:準(zhǔn)確稱取50毫克色譜純的萘于小燒杯中,以無水乙醇溶液溶解后定量移入50毫升容量瓶中,以無水乙醇稀刻度,搖勻(2)10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)萘溶液,由1 mg/mL萘標(biāo)準(zhǔn)確稀釋100倍即成;(3)1 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)萘溶液:由10 μg/mL萘標(biāo)液準(zhǔn)確稀釋10倍即成。

[實(shí)驗(yàn)步驟]

1、以試樣的劑為參比對未知芳香化合物的溶液測定,其紫外吸收光譜波長一般從220 nm—300 nm。間隔自選(一般間隔1—2 nm)。    2、繪制出吸收曲線后從“Ultraiolet Spectra of Aromatic Compounds”(芳香族  化合物的紫外光譜)一書中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照查出屬于何種有機(jī)化合物。    3、以95%乙醇為參比溶液,用1cm石英比色皿對標(biāo)準(zhǔn)萘—乙醇溶液測定紫外吸收光譜,波段從210 nm—230 nm,只要找出大吸收峰位置即可。    4、在儀器上以大吸收峰測定已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。    (1)用10 mL帶塞比色管6支,配制濃度分別為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列各10 mL。    (2)在分光光度計上以大吸收峰波長(~220 nm)測定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度,濃度從低到高,記錄吸收值。    5、對未知樣品進(jìn)行測定。    對幾個未知樣品中的萘含量進(jìn)行測定時的條件應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)系列一致。試樣中含量高,可用乙醇稀釋后測定。

[結(jié)果處理]

式中:C標(biāo)、C—分別為標(biāo)準(zhǔn)液和試樣中萘的濃度;

      A標(biāo)、A—分別為標(biāo)準(zhǔn)液和試樣液的吸光度;

      W—試樣重。

[注意事項(xiàng)]  (1)測定過程中比色皿應(yīng)加蓋子,并防止蓋子相互污染。  (2)讀數(shù)后立即關(guān)閉光閘,保護(hù)光電管。  (3)小心不要打破石英比色皿;比色皿光學(xué)玻璃面要用揩鏡紙擦。

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